产品货号：
KM0144
中文名称：
ROS指示剂(羟苯基荧光素)
英文名称：
3'-p-(hydroxyphenyl) fluorescein
产品规格：
1mg
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品以粉末形式提供，可直接溶于DMF配制成5mM储存液，常用工作浓度范围1～10μM，需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。
羟苯基荧光素和氨基苯基荧光素是由T.Nagano开发的两种活性氧指示剂，比H2DCFDA（DCFH-DA,DCFH）具更优秀的特异性和稳定性。羟苯基荧光素和氨基苯基荧光素显示有限的非选择性反应，和相对较高的光诱导氧化抗性。羟苯基荧光素和氨基苯基荧光素具细胞膜渗透性，本身无荧光，直到与羟基自由基或过氧亚硝基阴离子反应，还能与次氯酸阴离子反应，产生强绿色荧光（Ex/Em，~490/515nm），可用荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标板或流式细胞仪检测。
主要参数：
CAS NO.：359010-69-8
分子式：C26H16O6
分子量：424.4
纯度：≥95%
Ex/Em：492/515nm
溶解性：溶于DMSO（10mM）、DMF（5mM）
结构式：
保存：-20℃避光干燥保存，至少一年有效。
注意事项：
1．羟苯基荧光素仅用于科研研究，不可用于体外诊断研究。
2．羟苯基荧光素产生的荧光相对于其他活性氧探针比如DCFH弱很多，这是探针本身的特性决定的（。
3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法：
一、储存液制备
将低温保存的1mg粉末置于室温回温至少20min，之后加入471μL无水DMF配置成5mM储存液。充分溶解和混匀后，按照单次用量分装，-20℃避光干燥保存，避免反复冻融。
注：羟苯基荧光素能溶于DMSO（10mM），但有数据显示DMSO是羟基自由基的淬灭剂，会干扰检测和降低灵敏性。因此，建议用DMF作为溶剂。
二、溶液体系检测
正式实验前，取一管羟苯基荧光素储存液置于室温回温，使其充分融解。之后用合适的缓冲液（比如HHBS缓冲液，PBS缓冲液）稀释到所需的工作浓度。建议起始浓度为1～10μM，需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。
三、细胞体系检测
以下实验步骤仅做参考，最佳的工作浓度、孵育时间和温度需根据实际情况进行调整。在加入羟苯基荧光素工作液之前按需处理细胞。
注1：BSA和酚红会影响荧光，需谨慎使用。
注2：羟苯基荧光素能用于溶液体系或胞内ROS检测。
附表1活性氧探针对各种活性氧物质的反应特异性
相关搜索：ROS指示剂(羟苯基荧光素)，活性氧指示剂，HPF，3'-p-(hydroxyphenyl) fluorescein，359010-69-8
羟苯基荧光素和氨基苯基荧光素是由T.Nagano开发的两种活性氧指示剂，比H2DCFDA（DCFH-DA,DCFH）具更优秀的特异性和稳定性。羟苯基荧光素和氨基苯基荧光素显示有限的非选择性反应，和相对较高的光诱导氧化抗性。羟苯基荧光素和氨基苯基荧光素具细胞膜渗透性，本身无荧光，直到与羟基自由基或过氧亚硝基阴离子反应，还能与次氯酸阴离子反应，产生强绿色荧光（Ex/Em，~490/515nm），可用荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标板或流式细胞仪检测。
主要参数：
CAS NO.：359010-69-8
分子式：C26H16O6
分子量：424.4
纯度：≥95%
Ex/Em：492/515nm
溶解性：溶于DMSO（10mM）、DMF（5mM）
结构式：
保存：-20℃避光干燥保存，至少一年有效。
注意事项：
1．羟苯基荧光素仅用于科研研究，不可用于体外诊断研究。
2．羟苯基荧光素产生的荧光相对于其他活性氧探针比如DCFH弱很多，这是探针本身的特性决定的（。
3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法：
一、储存液制备
将低温保存的1mg粉末置于室温回温至少20min，之后加入471μL无水DMF配置成5mM储存液。充分溶解和混匀后，按照单次用量分装，-20℃避光干燥保存，避免反复冻融。
注：羟苯基荧光素能溶于DMSO（10mM），但有数据显示DMSO是羟基自由基的淬灭剂，会干扰检测和降低灵敏性。因此，建议用DMF作为溶剂。
二、溶液体系检测
正式实验前，取一管羟苯基荧光素储存液置于室温回温，使其充分融解。之后用合适的缓冲液（比如HHBS缓冲液，PBS缓冲液）稀释到所需的工作浓度。建议起始浓度为1～10μM，需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。
三、细胞体系检测
以下实验步骤仅做参考，最佳的工作浓度、孵育时间和温度需根据实际情况进行调整。在加入羟苯基荧光素工作液之前按需处理细胞。
- 根据具体用量，将DMF储存液用HHBS缓冲液或其他生理缓冲液稀释成1～10μM工作液。
- 根据实验设计处理细胞（比如，RASM细胞用50～100nM血管紧张素II处理3-5h）。
- 取步骤1准备的1～10μM工作液加入细胞，37℃孵育20～60min。
- 吸掉染色工作液，用HHBS或其他生理缓冲液替换。
- 用合适的荧光仪器（Ex/Em=492/515nm）来检测。
注1：BSA和酚红会影响荧光，需谨慎使用。
注2：羟苯基荧光素能用于溶液体系或胞内ROS检测。
附表1活性氧探针对各种活性氧物质的反应特异性
| ROS | ROS产生方法 | 羟苯基荧光素 (KM0144) | 氨基苯基荧光素 (KM0143) | DCFH (KM0062) |
| HO· | 100μM高氯酸亚铁(II)+1 mMH2O2 | 730 | 1200 | 7400 |
| ONOO– | 3μM(终浓度)ONOO– | 120 | 560 | 6600 |
| OCl- | 3μM(终浓度)OCl- | 6 | 3600 | 86 |
| 1O2 | 100μM3-(1,4-dihydro-1,4-epidioxy-1-naphthyl)propionic acid | 5 | 9 | 26 |
| ·O2– | 100μMKO2 | 8 | 6 | 67 |
| H2O2 | 100μMof H2O2 | 2 | ＜1 | 190 |
| NO | 100μMNOC-7 | 6 | ＜1 | 150 |
| ROO· | 100μMAAPH | 17 | 2 | 710 |
| Autoxidation? | 荧光光照2.5h | ＜1 | ＜1 | 2000 |
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